¿Cómo evaluar el efecto anti-moho del agente anti-moho del cuero?
La evaluación del efecto antifúngico del agente antifúngico del cuero generalmente incluye dos aspectos. Por un lado, la detección de la eficacia del agente antifúngico, cuyo objetivo principal es determinar si el fármaco tiene la capacidad de inhibir o matar el moho.
Los métodos de evaluación comúnmente utilizados incluyen: método de zona de inhibición, método de vertido en placa, método de bacterias puntuales, método de cultivo por dilución, método de difusión, determinación de la concentración inhibitoria mínima (MIC), etc .; por otro lado, efecto antifúngico después de agregar inhibidor de moho al cuero Los métodos de evaluación de laboratorio comúnmente utilizados incluyen: método de zona de inhibición, método de exposición natural, método de suspensión en habitación húmeda, método de enterramiento del suelo, método de medio y similares.
En la actualidad, los métodos de evaluación de laboratorio utilizados con frecuencia por los curtidores son los siguientes.
(1) método de zona de inhibición
Usando un papel redondo o una piel redonda (generalmente de 2 a 4 cm de diámetro), sumergido o rotado en una cierta concentración de la solución de agente antimoho durante un período de tiempo, y luego unido a un cultivo de recubrimiento una cierta cantidad de suspensión de esporas de moho Centre la placa, luego incube por un período de tiempo a una temperatura de (28 ± 1) ° C, humedad relativa ≥ 95%, observe la presencia o ausencia de una zona transparente de inhibición alrededor del papel redondo o piel redonda , o use un calibre Vernier para medir el diámetro del círculo en forma de hongo. El método de la zona de inhibición es solo un método cualitativo o semicuantitativo, y el tamaño de la zona de inhibición se ve afectado por la capacidad del inhibidor del moho para extenderse sobre la placa de agar (con la naturaleza del inhibidor del moho, el disolvente del inhibidor de moho disuelto en el inhibidor de moho) El tipo, la composición del medio, la distribución del agente antifúngico en la piel y las condiciones de cultivo se ven muy afectadas y, por tanto, el efecto de referencia es limitado. Sin embargo, este método también tiene las ventajas de un funcionamiento sencillo, identificable a simple vista, buena visibilidad y similares, y se utiliza a menudo para la evaluación preliminar del efecto a prueba de moho del inhibidor de moho.
(2) Método de concentración mínima inhibitoria (MIC)
El inhibidor de mildiú de prueba se formula en una serie de concentraciones, y luego se extrae asépticamente 1 ml, se agrega a la placa de cultivo esterilizada y luego se inyecta 1 ml de la suspensión bacteriana de prueba en cada placa de cultivo (o mediante asa de inoculación). La suspensión de la cepa de ensayo se esparce sobre la placa de medio de agar a la que se añade y solidifica el fungicida, y finalmente, se inyecta un medio de agar predeterminado a 40ºC en cada una de las placas de cultivo, y se mezcla y coagula uniformemente. Se coloca en un ambiente con una temperatura de (28 ± 1) ° C y una humedad relativa de ≥ 95% durante un período de tiempo (generalmente de 3 a 5 días), y se puede verificar la concentración más baja de la especie de prueba y comparado. El método MIC es un método cuantitativo, que puede reflejar mejor la virulencia del agente anti-hongos y facilitar la comparación de los efectos anti-moho entre diferentes agentes anti-hongos. Es uno de los métodos de expresión de virulencia más utilizados. Sin embargo, hay muchos factores que afectan el valor de CMI, como la fuente de la cepa de prueba, la cantidad de inóculo, el número de esporas de moho en la suspensión de esporas de moho, el medio, el tipo de disolvente en el que se disuelve el inhibidor de moho, la condiciones de cultivo, etc., por lo que la CIM del inhibidor de moho debe realizarse en las mismas condiciones.
(3) Método de suspensión en cámara húmeda
La piel tratada con agente antimoho (normalmente un cuadrado largo de 2,5 cm x 5,0 cm) se pulveriza sobre la superficie de la piel con un spray del molde para la suspensión de esporas y luego se suspende en una cámara de temperatura y humedad constantes. La temperatura fue (28 ± 1) ° C, la humedad relativa ≥ 95%] se cultivó durante 28 días, y la condición de mildiu se observó regularmente, y el efecto de mildiu del inhibidor de mildiu se juzgó por la condición de mildiu largo de la piel.
Las cepas ensayadas son generalmente Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Penicillium citrinum, Penicillium fuliginea y Trichoderma. Este método de medición es una prueba acelerada que simula el entorno natural. La muestra de resistencia al moho es de 0 o 1 grado, y las demás no están calificadas. Cada uno de estos métodos tiene sus propias ventajas y desventajas. Para el mismo agente antimoho, se pueden utilizar diferentes métodos de evaluación. Es posible que los resultados no sean los mismos. Incluso si se usa el mismo método, los resultados serán diferentes debido a diferentes condiciones como el tiempo, el lugar y el probador. Diferencias. Por lo tanto, los métodos de prueba de aceleración de estos laboratorios solo tienen cierto valor de referencia, y el rendimiento real de la aplicación del agente antifúngico también debe verificarse mediante la aplicación práctica.
